IPTG CAS:367-93-1 ราคาผู้ผลิต
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) เป็นอะนาล็อกสังเคราะห์ของแลคโตสที่ใช้กันทั่วไปในการวิจัยอณูชีววิทยาและการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีชีวภาพIPTG ใช้เพื่อกระตุ้นการแสดงออกของยีนในระบบแบคทีเรียเป็นหลัก โดยทำหน้าที่เป็นตัวกระตุ้นระดับโมเลกุลเพื่อเริ่มต้นการถอดรหัสยีนเป้าหมาย
เมื่อเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ IPTG จะถูกดูดซับโดยแบคทีเรียและสามารถจับกับโปรตีนตัวอัดครั่ง เพื่อป้องกันไม่ให้ขัดขวางการทำงานของครั่งโอเปอรอนครั่งโอเปอรอนเป็นกลุ่มของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญแลคโตส และเมื่อโปรตีนรีเพรสเซอร์ถูกกำจัดออกไป ยีนก็จะถูกแสดงออกมา
IPTG มักใช้ร่วมกับโปรโมเตอร์กลายพันธุ์ lacUV5 ซึ่งเป็นเวอร์ชันที่ออกฤทธิ์โดยประกอบด้วยส่วนประกอบของโปรโมเตอร์ lacด้วยการรวมการเหนี่ยวนำ IPTG เข้ากับโปรโมเตอร์กลายพันธุ์นี้ นักวิจัยสามารถบรรลุการแสดงออกของยีนในระดับสูงซึ่งช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนปริมาณมากสำหรับการทำให้บริสุทธิ์หรือการใช้งานขั้นปลายอื่นๆ
นอกจากการแสดงออกของยีนแล้ว IPTG ยังถูกใช้บ่อยครั้งในการตรวจคัดกรองสีน้ำเงิน/สีขาวในเทคนิคนี้ โดยทั่วไปแล้วยีน lacZ จะถูกหลอมรวมกับยีนที่สนใจ และแบคทีเรียที่สามารถแสดงยีนฟิวชันนี้ได้สำเร็จจะผลิตเอนไซม์ β-galactosidase ที่ทำงานอยู่เมื่อเพิ่ม IPTG ร่วมกับสารตั้งต้นของโครโมจีนิก เช่น X-gal แบคทีเรียที่แสดงยีนฟิวชันจะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงินเนื่องจากกิจกรรมของ β-galactosidaseสิ่งนี้ทำให้สามารถระบุตัวตนและคัดเลือกสายพันธุ์รีคอมบิแนนท์ที่บูรณาการยีนที่สนใจได้สำเร็จ
การเหนี่ยวนำการแสดงออกของยีน: IPTG มักใช้เพื่อกระตุ้นการแสดงออกของยีนเป้าหมายในระบบแบคทีเรียมันเลียนแบบแลคโตสที่เหนี่ยวนำโดยธรรมชาติและจับกับโปรตีนตัวอัดครั่ง เพื่อป้องกันไม่ให้เกิดการปิดกั้นโอเปอเรเตอร์ครั่งสิ่งนี้ทำให้สามารถถอดความและแสดงออกของยีนที่ต้องการได้
การแสดงออกและการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีน: การเหนี่ยวนำ IPTG มักใช้ในการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในปริมาณมากเพื่อวัตถุประสงค์ต่างๆ เช่น การศึกษาทางชีวเคมี การผลิตเพื่อการรักษา หรือการวิเคราะห์โครงสร้างด้วยการใช้เวกเตอร์การแสดงออกที่เหมาะสมและการเหนี่ยวนำ IPTG นักวิจัยสามารถบรรลุการผลิตโปรตีนเป้าหมายในระดับสูงในโฮสต์ของแบคทีเรีย
การคัดกรองสีน้ำเงิน/สีขาว: IPTG มักใช้ร่วมกับยีน lacZ และสารตั้งต้นของโครโมเจนิก เช่น X-gal สำหรับการตรวจคัดกรองสีน้ำเงิน/สีขาวโดยทั่วไปแล้ว ยีน lacZ จะถูกหลอมรวมกับยีนที่สนใจ และแบคทีเรียที่สามารถแสดงยีนฟิวชันนี้ได้สำเร็จจะผลิตเอนไซม์ β-galactosidase ที่ทำงานอยู่เมื่อ IPTG และซับสเตรตโครโมเจนิกถูกเติม สายพันธุ์รีคอมบิแนนท์ซึ่งแสดงออกยีนฟิวชันจะเปลี่ยนเป็นสีน้ำเงิน ช่วยให้ระบุและคัดเลือกได้ง่าย
การศึกษาการควบคุมยีน: การเหนี่ยวนำ IPTG มักใช้ในการวิจัยเพื่อศึกษาการควบคุมของยีนและโอเปอรอน โดยเฉพาะโอเปอเรเตอร์ครั่งนักวิจัยสามารถตรวจสอบกลไกการควบคุมยีนและบทบาทของปัจจัยต่างๆ หรือการกลายพันธุ์ได้โดยการควบคุมความเข้มข้นของ IPTG และติดตามการแสดงออกของส่วนประกอบของ lac operon
ระบบการแสดงออกของยีน: IPTG เป็นองค์ประกอบสำคัญในระบบการแสดงออกของยีนหลายชนิด เช่น ระบบที่ใช้โปรโมเตอร์ T7ในระบบเหล่านี้ ครั่งโปรโมเตอร์มักจะใช้เพื่อขับเคลื่อนการแสดงออกของ T7 RNA polymerase ซึ่งในทางกลับกันจะถ่ายทอดยีนเป้าหมายภายใต้การควบคุมของลำดับโปรโมเตอร์ T7IPTG ใช้เพื่อกระตุ้นการแสดงออกของ T7 RNA polymerase ซึ่งนำไปสู่การกระตุ้นการแสดงออกของยีนเป้าหมาย
| องค์ประกอบ | C9H18O5S |
| การทดสอบ | 99% |
| รูปร่าง | ผงสีขาว |
| หมายเลข CAS | 367-93-1 |
| การบรรจุ | ขนาดเล็กและเทอะทะ |
| อายุการเก็บรักษา | 2 ปี |
| พื้นที่จัดเก็บ | เก็บในที่เย็นและแห้ง |
| การรับรอง | ไอเอสโอ. |
