4-Nitrophenyl เบต้า-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

ผลกระทบ: ONPG เป็นสารตั้งต้นที่ใช้ตรวจจับการมีอยู่และกิจกรรมของเอนไซม์ β-galactosidase โดยเฉพาะเมื่อมีเอนไซม์ β-galactosidase และทำงานอยู่ มันจะแยก ONPG ออกเป็นสองผลิตภัณฑ์: o-nitrophenol และอนุพันธ์ของกาแลคโตสการปลดปล่อยโอ-ไนโตรฟีนอลส่งผลให้มีสีเหลืองเปลี่ยนไป ซึ่งสามารถวัดได้โดยใช้สเปกโตรโฟโตมิเตอร์

การประยุกต์ใช้: ONPG มีการใช้งานหลายอย่างในด้านอณูชีววิทยาและการวิจัยทางชีวเคมี:

การหาปริมาณกิจกรรมของเอนไซม์ β-galactosidase: ONPG มักใช้ในการวัดและหาปริมาณกิจกรรมของเอนไซม์ β-galactosidaseอัตราการเกิดโอ-ไนโตรฟีนอลซึ่งเป็นสัดส่วนโดยตรงกับกิจกรรมของเอนไซม์สามารถวัดได้โดยใช้สเปกโตรโฟโตเมตริก

การแสดงออกและการควบคุมของยีน: ONPG มักใช้ในการทดลองที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของยีนและการศึกษากฎระเบียบมักใช้ในการตรวจวิเคราะห์ฟิวชันโปรตีน เช่น ระบบฟิวชั่น lacZ ที่ใช้กันทั่วไป เพื่อศึกษาการแสดงออกของยีนภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์เฉพาะกิจกรรมเบต้ากาแลคโตซิเดสที่วัดโดยใช้ ONPG ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับระดับการแสดงออกของยีน

การคัดกรองกิจกรรมของ β-galactosidase: ONPG สามารถใช้เป็นวิธีการคัดกรองด้วยการวัดสีในเทคโนโลยี DNA ลูกผสมเพื่อระบุการมีอยู่และการทำงานของยีน LacZ ซึ่งเข้ารหัส β-galactosidaseวิธีการคัดกรองนี้ช่วยในการระบุโคลนที่มียีนที่สนใจ

การศึกษาจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์: ONPG ยังมีประโยชน์ในการศึกษาจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์ β-galactosidaseด้วยการวัดอัตราปฏิกิริยาของเอนไซม์-สารตั้งต้นที่ความเข้มข้นของสารตั้งต้นที่แตกต่างกัน ทำให้สามารถระบุพารามิเตอร์ทางจลนศาสตร์ เช่น ค่าคงที่ Michaelis-Menten (Km) และอัตราปฏิกิริยาสูงสุด (Vmax)