ฟีนิลกาแลคโตไซด์ CAS:2818-58-8

ผลต่อการทำงานของเอนไซม์: Phenylgalactoside มักใช้เพื่อวัดการทำงานของเอนไซม์ β-galactosidaseเมื่อฟีนิลกาแลคโตไซด์ถูกไฮโดรไลซ์ด้วย β-galactosidase มันจะปล่อย p-nitrophenolการสะสมของ p-nitrophenol สามารถวัดได้ในเชิงปริมาณ โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกิจกรรมของ β-galactosidaseผลกระทบนี้ได้รับการควบคุมในการใช้งานต่างๆ เช่น การตรวจวิเคราะห์เอนไซม์และระบบคัดกรอง

การวิเคราะห์การแสดงออกของยีน: Phenylgalactoside มักใช้เป็นสารตั้งต้นในการทดลองทางอณูชีววิทยาเพื่อศึกษาการแสดงออกของยีนยีน lacZ ซึ่งเข้ารหัส β-galactosidase โดยทั่วไปจะหลอมรวมกับลำดับการควบคุมของยีนอื่น ๆ ที่น่าสนใจการแสดงออกของยีน lacZ และการไฮโดรไลซิสของฟีนิลกาแลคโตไซด์โดย β-galactosidase สามารถบ่งบอกถึงรูปแบบการแสดงออกและระดับของยีนเป้าหมายที่กำลังศึกษา

ระบบคัดกรอง: ฟีนิลกาแลกโตไซด์เป็นองค์ประกอบสำคัญของระบบคัดกรองที่ใช้ประโยชน์จากกิจกรรมของβ-galactosidaseตัวอย่างหนึ่งที่เป็นที่รู้จักอย่างกว้างขวางคือวิธีการคัดกรองสีน้ำเงิน-ขาว ซึ่งใช้ในการระบุเซลล์รีคอมบิแนนต์หรือเซลล์ที่ถูกเปลี่ยนรูปในการทดลองทางอณูชีววิทยาโคโลนีที่รับ DNA ลูกผสมได้สำเร็จหรือผ่านการรวมตัวกันทางพันธุกรรมจะแสดง β-galactosidase ซึ่งนำไปสู่การไฮโดรไลซิสของฟีนิลกาแลกโตไซด์และการก่อตัวของสีฟ้า

การทำให้โปรตีนบริสุทธิ์: ในบางกรณี ฟีนิลกาแลกโตไซด์สามารถใช้เป็นลิแกนด์สำหรับอัฟฟินิตี้โครมาโตกราฟีเพื่อชำระโปรตีนที่จับกับหรือกระตุ้นโดยβ-galactosidase โดยเฉพาะโปรตีนที่สนใจอาจมีแท็กอัฟฟินิตี้หรือฟิวชันแท็กซึ่งประกอบด้วยโดเมนการจับ β-กาแลคโตซิเดสด้วยการส่งส่วนผสมโปรตีนผ่านคอลัมน์ที่มีฟีนิลกาแลคโตไซด์ที่ตรึงไว้ โปรตีนที่ต้องการจะสามารถเลือกเก็บรักษาไว้และชะล้างในภายหลังได้